NEFA Test Kiti, NEFA'nın miktarının belirlenmesine yönelik bir araçtır

NEFA Test Kiti NEFA'nın (Nitrik Oksit) miktarının belirlenmesi için bir araçtır. Kan veya doku örneklerinde NEFA konsantrasyonunu belirlemek için kullanılır. NEFA, enerji metabolizmasının, kalp uyarılabilirliğinin, nöromüsküler iletinin, kan basıncının ve kanın pıhtılaşmasının düzenlenmesinden sorumlu olan hayati bir besindir. Esas olarak kemik, kas, yumuşak doku ve kırmızı kan hücrelerinde bulunur.

Hazırlık

NEFA, DNA'ya bağlanma yeteneğine sahip, 50,2 kDa'lık küçük bir proteindir. Esterleşmemiş palmitik asit üreten sitozolik tip I yağ asidi sentaz (FAS) kompleksidir. Asil-CoA oksidazın (ACS) varlığında FAS kompleksi, 3-metil-N-etil-N-(b-hidroksietil)-anilini, asetil-CoA'nın moleküler öncüsü olan 4-aminoantipirine oksitler. Bu süreç tüm ökaryotik organizmalar için çok önemli bir enzimatik süreçtir.

NEFA, ağır bir yağ kütlesine sahip olmasa da, periferik dokular için önemli bir yakıt kaynağıdır. Karaciğer tarafından metabolize edilir ve albumin ile kompleks halinde periferik dokulara taşınır. NEFA ayrıca FAS kompleksinin bir tioesteraz (TE) alanı tarafından da salınır.

Pipetleme

ELISA kitleri küçük kimyasal bileşikleri, proteinleri ve peptidleri tespit etmek için kullanılır. Bu kitler E.coli'de ifade edilen rekombinant proteinlere dayanmaktadır. Kitler azid, timerosal ve diğer doğal kaynakları içermez.

Kit içerisinde BSA, pirojensiz seyreltme tamponu ve yıkama solüsyonu gibi reaktifler bulunmaktadır. Yıkama solüsyonu 2-8°C'de iki hafta stabildir. Seyreltme tamponu %0,9 fizyolojik salin içerir.

Kitin dahili bir NEFA standardı vardır. Bu, numunede beklenen konsantrasyonla eşleşen bir konsantrasyonda NEFA ile birleştirilir. Numunedeki NEFA konsantrasyonunu hesaplamak için mavi-mor pigmentin 546 nm'deki absorbansı ölçülür.

Kolorimetrik

WAKO NEFA kitinin kullanılması, bazıları anlamsız olanlar da dahil olmak üzere çeşitli sonuçlar ortaya çıkardı. Bununla birlikte NEFA kiti, hayvan doku örneklerinin bağıl yağ asidi içeriğinin belirlenmesi söz konusu olduğunda değerli bir rakiptir. Bu nedenle NEFA kiti en popüler laboratuvar testlerinden biridir. Kit, kan, serum, tükürük ve çeşitli lipitler dahil olmak üzere farklı türdeki numunelerin test edilmesine yönelik talimatlarla birlikte gelir.

Kitin en heyecan verici kısmı, lipitlerde yaygın olarak bulunanlar da dahil olmak üzere çeşitli yağ asitlerini ölçmek için kullanılabilmesidir. Kit, insanlarda ve hayvanlarda bulunan C-8 ve C-16 yağ asitleri de dahil olmak üzere çeşitli yağ asitlerini tespit etmek için tasarlanmış bir dizi enzimle birlikte gelir. Bununla birlikte kitin geniş bir aralıkta yüksek hassasiyetli FFA konsantrasyonlarında kullanılması önerilmez.

Elektrokimyasal

NEFA'lar insan sağlığı açısından önemli yağ asitleridir ancak nadiren değerlendirilir. Ayrıca bunların tespit edilmesi oldukça pahalıdır. Bu nedenle konsantrasyonlarındaki değişikliklerin izlenmesi, hastalıkların daha doğru bir şekilde önlenmesine ve yönetilmesine yardımcı olabilir. Bu çalışmada sensör yüzeyi olarak PDA-MWCNT kullanılarak NEFA için bir elektrokimyasal test kiti geliştirildi. Bu elektrot, NEFA oksidasyon adımları için iyi bir elektrokatalitik aktivite sergiledi ve gerçek hayattaki uygulamalarda kullanılabilir.

Enzim elektrodu, PDA-MWCNT ve ACOD, ACS ve polimerden oluşan çok katmanlı bir kompozit filmden oluşuyordu. Katmanların sırası, enzimatik reaksiyon sırasına uyacak şekilde seçildi. ACS ve ACOD'un filmde biyolojik olarak aktif kaldığı belirlendi.

T2D'de NEFA konsantrasyonu

Kandaki NEFA konsantrasyonları obezite ve hipertansiyon bağlamında incelenmiştir. Bu bileşiklerin a1-adrenerjik uyarım yoluyla kan basıncının yükselmesini teşvik ettiği ve oksidan stresi arttırdığı gösterilmiştir. NEFA'lar ayrıca metabolik sendromla da ilişkilidir. Bu bileşikler hipertansiyon gelişiminde önemli olabilir.

İntravenöz glukoz yüklemesine karşı plazma NEFA yanıtını tanımlamak için çeşitli modeller önerilmiştir. Boston modeli NEFA konsantrasyon artışının dördüncü aşamasını doğru bir şekilde tasvir etti. Ancak model başlangıçtaki gecikme aşamasını açıklamadı. Fabian modeli bu aşamayı tanımlamak için basit bir üstel eğim kullanmıştır. Benzer şekilde Thomaseth modeli de geri tepme aşamasını tanımlayamadı.

Trigliseritlerde NEFA seviyeleri

Bariatrik cerrahinin plazma NEFA bileşimi üzerindeki etkilerini araştıran çeşitli çalışmalar vardır. 2016 yılında yayınlanan bir meta-analizde serum NEFA düzeylerinin ameliyattan 6 ve 12 ay sonra azaldığı görüldü. Bunun nedeni insülin seviyelerinin azalması olabilir. Başka bir çalışmada, bir grup obez hastada Roux-en-Y gastrik bypass ameliyatından önce ve sonra plazma NEFA'ları ölçüldü.

Yedi NEFA'nın konsantrasyonu ameliyattan 9 ay sonra azaldı. Linoleat (bir omega-6 yağ asidi) 18:2, stearat 18:0 ve oleat 16:0 oranında azaltıldı. Ancak dokosaheksaenoatın konsantrasyonu etkilenmedi. NEFA'lar, yağ asidi metil esterlerine (FAME'ler) dönüştürüldü. Bunlar daha sonra gaz kromatografisi-kütle spektrometresi (GC-MS) ile analiz edildi.