Birlikte harika bir gelecek yaratalım!
Adenozin Deaminaz (ADA), bağışıklık tepkisinde rol oynayan doğal bir enzimdir. Adenozin Difosfatın (ADP) işlevi hücreleri aktive ederek membran geçirgenliğini ve sitotoksik etkiyi gerçekleştirmektir. Adenozin, normal insan beyni aktivitesi için gerekli olan en önemli amino asitlerden biri olarak tanımlanmıştır. Karaciğer tarafından sentezlenir ve bağışıklık sisteminin eylemleri yoluyla kan plazmasına dağıtılır. Adenozin Difosfat, anti-viral genetik materyalin bir taşıyıcısıdır. Biomedical Expo'da ADA Aktivite Test Kiti daha önce bahsedilen BioVision Sitokin ile kombinasyon halinde kullanılacak.
Adenozin difosfat (ADP), T-lenfosit büyüme faktörünün bir taşıyıcısıdır. BioVision Sitokin'de, adenosin deaminaz (ADO) disseke böbrekten ekstrakte edilir ve ticari olarak temin edilebilen spektrofotometrik otomatik test kullanılarak analiz edilir. Reaktif, analitle reaksiyonunu önlemek için anti-fosfo-dGlukoz (PI) ile ön işleme tabi tutuldu.
Ticari olarak temin edilebilen AIDA Aktivite Test Kitinin bileşimi iki ana bileşeni içerir: reaktif ve laboratuvar ekipmanı. Aida Activity Assay Kit'in içerdiği reaktifler saflaştırılmış enzim kokteyli (Sigma-FCA) içerir. Laboratuar ekipmanı bir mikroplaka tarayıcı (bir cam mikroskop lamı arkasına monte edilmiş), cam eşyalar, standart eğri sonuçları kitabı ve durulama şişesinden oluşur. Kullanmadan önce Aida Activity Assay Kit numuneleri klorsuz su ile yıkanmalıdır. Reaktif ve laboratuvar ekipmanının kullanımı yalnızca laboratuvar testleriyle sınırlı değildir.
Aida Aktivite Test Kitinin toplam adenosin deaminaz aktivitesini ölçme yeteneğini incelemek için birkaç deney oturumu gerçekleştirildi. İlk oturum dört günlük manuel izlemeden oluşuyordu. Yüz elli mikrolitre Aida-GFP musluk suyunda çözüldü ve fosfat tamponlu salin solüsyonuyla karıştırıldı. Yirmi dakika sonra numuneler HPLC kütle dengesi ekranında test edildi.
İkinci oturum, iki gün daha manuel izlemeyi içeriyordu. Numuneler yukarıda açıklandığı gibi iki saat boyunca eğri kasetine enjekte edildi. Üçüncü seans, aynı odada üç gün daha manuel izlemeyi ve ardından dört saatlik deri altı adenozin deaminaz (ADCA) enjeksiyonunu içeriyordu. Analiz için bir saat sonra kan örneği alındı.
Tükürük testi için, steril olmayan bir kalıpta beş yüz mikrolitre standart deaminaz ve pH gülü solüsyonu karıştırıldı. Domuzların isteğe göre sade sudan diyet sodaya kadar çeşitli sıvıları içmelerine izin verildi. Standart solüsyonlar kaynama noktasına ulaştığında önceden belirlenmiş hacimde tükürük içeren bir damlalık yerleştirildi ve adenozin deaminaz aktivitesi ölçüldü.
Altı numuneden oluşan son grup, ticari olarak temin edilebilen Tükürük bazlı Fosforimidazolamin Tahlil Kiti (Saproflavil; Thermo Instruments) kullanılarak analiz edildi. Bu analiz setinde, tek bir damla Fosforimidazolamin/tükürük ada reaktifi bir hacim musluk suyuyla karıştırıldı ve kurutulmuş toz numunelere ilave edildi. Otuz dakika sonra aynı numuneden ikinci bir numune alındı. Bu durumda tükürükteki aktivite hemen ölçüldü. Kit, insan tükürüğündeki asitin aktivitesini ölçmek için özel olarak tasarlanmıştı. Beklendiği gibi, tespit edilebilecek önemli miktarda aktivite vardı.
Beklendiği gibi her iki analizci de benzer sonuçlar üretti. Tükürük-Pozitron Emisyon Tomografisi (SPECT) analizinin son derece spesifik doğası, son derece hassas metodoloji (yüksek ağız içi sıvı tespiti) ile birlikte, sürekli olarak yüksek doğruluk ve anlamlı ölçümlerle sonuçlandı. İşlemlerde kullanılan laboratuvar personelinin tamamı alanında uzman kişilerden oluşuyordu. Kirlenme ya da herhangi bir deney hatası olduğuna dair hiçbir kanıt yoktu. Test denekleri bilgilendirilmiş onam verdi ve prosedür, Amerikan Klinik Endokrinologlar Birliği tarafından belirlenen tavsiyelere uygun olarak yapıldı. Genel olarak Adenozin Deaminaz Test Kitinden elde edilen sonuçlar, bağımsız klinik laboratuvarlardan ayrı çalışmalarla doğrulanan iyi bir tekrarlanabilirlik göstermiştir.